使用目的

デング熱 NS1 Ag-IgG/IgM コンボ テストは、デング熱ウイルス感染症の診断に役立つ、血清または血漿中のデング熱ウイルスに対する抗体 (IgG および IgM) およびデング熱ウイルス NS1 抗原の定性的検出のための迅速クロマトグラフィー イムノアッセイです。

[まとめ]

デング熱は、蚊によって媒介されるデングウイルスによって引き起こされる急性ベクター媒介感染症です。デングウイルス感染は、劣性感染、デング熱、デング出血熱、デング出血熱を引き起こす可能性があります。デング熱の典型的な臨床症状には、一部の患者における突然の発症、高熱、頭痛、重度の筋肉痛、骨痛、関節痛、皮膚発疹、出血傾向、リンパ節肥大、白血球数の減少、血小板減少症などが含まれます。この病気は基本的に熱帯・亜熱帯地域で流行しており、この病気は蚊によって媒介されるため、季節的に流行があり、毎年5月～11月に流行し、7月～9月にピークを迎えます。新たな流行地域では、国民は一般に感受性が高いが、発生率は主に成人であり、流行地域では、発生率は主に子供である。

原理

デング熱 NS1 Ag-IgG/IgM コンボ テストは、血清または血漿中のデング熱ウイルス抗体 (IgG および IgM) およびデング熱ウイルス NS1 抗原を検出するための定性メンブレン ストリップ ベースのイムノアッセイです。

IgG/IgM 検査の場合: 検査装置は以下で構成されます: 1) 金コロイドと結合したデング熱組換えエンベロープ抗原 (デング熱結合体) を含むワインレッド色の結合パッド、2) 2 つのテストライン (T1 および T2 ライン) を含むニトロセルロース膜ストリップ、およびコントロールライン（Cライン）。T1 ラインは IgM 抗デング熱検出用の抗体でプレコーティングされており、T2 ラインは IgG 抗デング熱検出用の抗体でコーティングされています。適切な量​​の試験片がテストカセットのサンプルウェルに分注されると、試験片は毛細管現象によってカセット全体を移動します。抗デング熱 IgG が検体中に存在する場合、デング熱複合体に結合します。免疫複合体は、T2 バンド上にあらかじめコーティングされた試薬によって捕捉され、ワインレッド色の T2 ラインを形成します。これは、デング熱 IgG 陽性検査結果を示し、最近の感染または繰り返しの感染を示唆します。IgM 抗デング熱が検体中に存在する場合、デング熱複合体に結合します。その後、免疫複合体は T1 ライン上にコーティングされた試薬によって捕捉され、ワインレッド色の T1 ラインを形成します。これはデング熱 IgM 陽性検査結果を示し、新たな感染を示唆します。T ライン (T1 および T2) が存在しない場合は、陰性結果が示唆されます。

NS1 検査の場合: この検査手順では、抗デング熱 NS1 抗体がカセットのテストライン領域に固定化されます。全血/血清/血漿検体を検体ウェルに入れると、検体パッドに塗布された抗デング熱 NS1 抗体でコーティングされた粒子と反応します。この混合物はクロマトグラフィーによってテストストリップの長さに沿って移動し、固定化された抗デング熱 NS1 抗体と相互作用します。検体にデングウイルス NS1 抗原が含まれている場合、テストライン領域に色の付いた線が表示され、陽性結果が示されます。検体にデングウイルス NS1 抗原が含まれていない場合、この領域に色付きの線は表示されず、陰性結果を示します。

手順のコントロールとして機能するため、コントロール ライン領域には色付きのラインが常に表示され、適切な量の検体が追加され、メンブレン ウィッキングが発生したことを示します。

保管と安定性

密封パウチに入れて室温または冷蔵（4～30℃または40～86°F）で保管してください。テストデバイスは、密封されたパウチに印刷されている有効期限まで安定しています。

テストは使用するまで密封されたパウチに保管しておく必要があります。

検体の収集と準備

1. デング熱 NS1 Ag-IgG/IgM コンボ テストは、血清または血漿に対して使用できます。

2. 通常の臨床検査手順に従って、全血、血清、または血漿の検体を収集すること。

3. 検査は検体採取後すぐに実施する必要があります。標本を室温に長時間放置しないでください。長期保存する場合は、-20℃以下で保存してください。

4. 試験前に試験片を室温に戻します。凍結した検体は、試験前に完全に解凍し、よく混合する必要があります。検体は凍結と解凍を繰り返してはなりません。

試験手順

試験前に、試験、検体、緩衝液、および/またはコントロールが室温 15 ～ 30℃ (59 ～ 86 °F) になるようにしてください。

1. 開封前にパウチを室温に戻してください。密封されたパウチからテストデバイスを取り出し、できるだけ早く使用してください。テストデバイスを清潔で水平な表面に置きます。

2. IgG/IgM 検査の場合:スポイトを垂直に持ち、検体 1 滴 (約 10 μl) を検査装置の検体ウェル (S) に移し、その後バッファー 2 滴 (約 70 μl) を加えてタイマーをスタートします。以下の図を参照してください。

3. NS1 検査の場合: スポイトを垂直に持ち、8 ～ 10 滴の血清または血漿 (約 100 μl) を検査装置の検体ウェル (S) に移し、タイマーをスタートします。以下の図を参照してください。

4. 色付きの線が表示されるまで待ちます。15 分で結果を読み取ります。20 分後には結果を解釈しないでください。

結果の解釈

ポジティブ：

IgG/IgM テストの場合: コントロール ラインと少なくとも 1 つのテスト ラインがメンブレン上に表示されます。T2 テストラインの出現は、デング熱特異的 IgG 抗体の存在を示します。T1 テストラインの出現は、デング熱特異的 IgM 抗体の存在を示します。T1 ラインと T2 ラインの両方が表示される場合は、デング熱特異的 IgG 抗体と IgM 抗体の両方が存在することを示します。抗体濃度が低いほど、結果のラインは弱くなります。

NS1 テストの場合: 2 つの線が表示されます。1 つの線が常にコントロール ライン領域 (C) に表示され、別の 1 つの明らかな色の線がテスト ライン領域に表示されます。

ネガティブ：

コントロール領域 (C) には 1 本の色の線が表示されます。テスト ライン領域には明らかな色の線は表示されません。

無効: 制御線が表示されません。コントロールラインの故障の最も可能性の高い理由は、不十分な検体量または不適切な手順技術です。手順を確認し、新しいテストデバイスでテストを繰り返します。問題が解決しない場合は、直ちにテスト キットの使用を中止し、最寄りの販売店にご連絡ください。